Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Furin Antibody (B-6) Alexa Fluor® 488: sc-133142 AF488. Direct fluorescent western blot analysis of Furin expression in NIH/3T3 (A), KNRK (B) and SP2/0 (C) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker™ MW Tag-Alexa Fluor® 647: sc-516791.
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Furin双切口酶质粒(m): sc-422141-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Furin 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Furin双切酶质粒（m）和Furin双切酶质粒（m2）编码针对Furin的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Furin: sc-133142，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Furin双切口酶质粒(m) | sc-422141-NIC | 20 µg | $410.00 |
Furin（PCSK3）是一种钙依赖性的前体蛋白转化酶，在分泌途径中（包括反式高尔基网络和内体区室）将前体蛋白加工为成熟的生物活性形式。它通过切割含碱性基序的底物，调控激素、生长因子、受体以及金属蛋白酶的成熟，从而影响TGF-β/BMP、Notch以及细胞外基质重塑等信号级联过程。在小鼠系统中，Furin的活性通过对膜蛋白和分泌蛋白进行受控蛋白水解，塑造发育模式建立、免疫与炎症反应以及细胞间通讯。文献表明，Furin依赖性加工的失调与组织稳态改变及病理生理过程相关，因此可作为研究蛋白酶驱动信号传导与蛋白质稳态机制的关键节点。
Furin 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Furin 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Furin内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Furin的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Furin基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。