FRAT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406802

概要

FRAT2（Frequently rearranged in advanced T-cell lymphomas 2）は、GSK3βと相互作用してβ-カテニンの安定性および下流の転写プログラムに影響を与えることで、カノニカルなWnt/β-カテニンシグナル伝達を調節する細胞質タンパク質をコードします。この経路を通じてFRAT2は、細胞増殖、分化、発生過程におけるパターニングの制御に関与し、細胞周期の進行や細胞運命決定を制御するより広範なシグナルネットワークとも交差し得ます。Wnt経路活性の異常は、がん化（腫瘍性形質転換）や組織リモデリングを含む多様な疾患文脈で示唆されており、FRAT2はβ-カテニン依存的な遺伝子発現を解析する上で有用な結節点となります。FRAT2の機能解析は、ヒト細胞システムにおける経路間クロストークや状況依存的な制御の機構研究を支えます。

FRAT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFRAT2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FRAT2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FRAT2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FRAT2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FRAT2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FRAT2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FRAT2の機能に不可欠なFRAT2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FRAT2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FRAT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFRAT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FRAT2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FRAT2 HDRプラスミド（h）および FRAT2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFRAT2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFRAT2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。