FOXF2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420374

概要

Forkhead box F2（Foxf2）は、転写因子FOXF2をコードしており、間葉系で高発現する発生遺伝子プログラムの制御因子として、組織パターニング、細胞外マトリックス（ECM）構築、上皮—間葉間シグナル伝達を形成します。マウスでは、Foxf2の活性は、TGF-β/BMPシグナル伝達に関連する経路、Wntの調節、ならびに細胞骨格／ECMリモデリングを含む形態形成因子（モルフォゲン）刺激の下流にある転写ネットワークを制御することで、器官形成および間質分化に寄与します。FOXF2依存的な転写の破綻は、文献において、線維芽細胞の挙動変化、異常な組織構築、ならびにバリア機能や血管関連の間質コンパートメントの変化と関連づけられており、疾患に関連するリモデリング表現型との関係が示唆されています。発生および間質遺伝子制御の結節点として、Foxf2は、線維化様応答、腫瘍—間質相互作用、ならびにマウスモデルにおける発生異常などの文脈で、しばしば研究されています。

FOXF2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFoxf2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Foxf2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Foxf2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FOXF2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FOXF2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Foxf2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FOXF2の機能に不可欠なFoxf2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Foxf2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FOXF2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFOXF2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Foxf2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FOXF2 HDRプラスミド（m）および FOXF2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFoxf2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFoxf2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。