FKBP11 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405563-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FKBP11O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FKBP11 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FKBP11 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FKBP11. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FKBP11 Anticorpo (D-3): sc-398700
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FKBP11 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405563-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FKBP11 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405563-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FKBP11 codifica um membro da família de proteínas ligantes de FK506 localizado no retículo endoplasmático, com atividade de isomerase peptidil-prolil cis–trans, que dá suporte ao dobramento de proteínas e ao controle de qualidade na via secretória. Encontra-se enriquecido em estados celulares secretadores de anticorpos e em outros estados altamente secretórios, nos quais contribui para a proteostase do RE, o dobramento de polipeptídeos recém-sintetizados e a coordenação da sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (UPR). Por meio dessas funções, o FKBP11 está associado à adaptação celular ao estresse do RE e à regulação da maturação e do tráfego de proteínas. A homeostase do RE desregulada envolvendo o FKBP11 tem sido investigada em contextos de inflamação crônica, diferenciação de células imunes e patobiologia associada ao estresse, nos quais a carga secretória e a capacidade de proteostase se encontram alteradas.
FKBP11 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FKBP11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FKBP11. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FKBP11. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FKBP11 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.