Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
FcRH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432859
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FcRH1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FcRH1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FcRH1 Anticorpo (E-8): sc-515003
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FcRH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432859 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Fcrl1 codifica o receptor semelhante a Fc 1 (FcRH1), um receptor imunorregulador associado a células B, implicado no ajuste da sinalização induzida pelo receptor de antígeno e dos programas de ativação a jusante. Em tecidos linfoides de camundongo, a expressão de FcRH1 está ligada a estados de diferenciação de células B e à modulação de eventos de sinalização proximais que se intersectam com vias que controlam o fluxo de cálcio, a atividade de MAPK e respostas transcricionais após o engajamento do BCR. Ao influenciar os limiares de ativação e sobrevivência das células B, Fcrl1 oferece um ponto de entrada funcional para estudar a dinâmica do centro germinativo, a tolerância imunológica e mecanismos que moldam as respostas de anticorpos. Redes de sinalização do tipo “receptor semelhante a Fc” desreguladas são frequentemente investigadas no contexto de fenótipos aberrantes de células B e patologias associadas ao sistema imune, reforçando a relevância de Fcrl1 para pesquisas de imunologia mecanística.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FcRH1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Fcrl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Fcrl1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Fcrl1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FcRH1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Fcrl1 para a investigação da sinalização de FcRH1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Fcrl1 críticos para a função FcRH1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Fcrl1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FcRH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo FcRH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Fcrl1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FcRH1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR FcRH1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Fcrl1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Fcrl1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.