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FBP1慢病毒激活颗粒(m) | sc-424568-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 **Fubp1** 编码远上游元件结合蛋白1(FBP1)。FBP1 是一种可结合单链 DNA/RNA 的调控因子,能够将转录调控与转录后 RNA 代谢相耦联。FBP1 与启动子远上游元件相互作用,调节 RNA 聚合酶 II 依赖的转录;同时也可通过结合具有结构特征的核酸来影响 mRNA 的稳定性与翻译。通过这些作用,Fubp1 参与调控细胞周期推进、应激反应基因表达以及谱系特异性的转录状态等程序。在与疾病相关的情境中,FUBP1 相关调控网络的失衡与生长控制改变及分化表型异常有关,这也支持在致癌及神经发育通路中开展机制研究。
FBP1 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Fubp1 表达。
FBP1 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Fubp1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性FBP1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Fubp1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。