Estrogen Receptor alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400011-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Estrogen Receptor alphaO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Estrogen Receptor alpha (h) e o Plasmídeo Double Nickase Estrogen Receptor alpha (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ESR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Estrogen Receptor alpha Anticorpo (F-10): sc-8002
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Estrogen Receptor alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400011-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Estrogen Receptor alpha Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400011-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ESR1 codifica o receptor de estrogênio alfa (ERα), um receptor nuclear ativado por ligante que atua como fator de transcrição, coordenando programas gênicos responsivos ao estrogênio. Após a ligação do hormônio, o ERα se associa a elementos de resposta ao estrogênio e a complexos de correpuladores para modular a acessibilidade da cromatina e a transcrição, integrando a sinalização entre as redes PI3K/AKT, MAPK/ERK e de regulação do ciclo celular. A atividade do ERα molda a proliferação celular, a diferenciação e a homeostase metabólica em múltiplos tecidos, e alterações na regulação do ESR1 ou formas variantes são frequentemente estudadas na biologia de tumores hormônio-responsivos e na desregulação da sinalização endócrina. Como a transcrição dependente de ERα se cruza com o controle epigenético e com a comunicação entre receptores, o ESR1 é um alvo central para dissecar a sinalização de receptores esteroides e a arquitetura de redes transcricionais.
Estrogen Receptor alpha O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ESR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ESR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ESR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ESR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.