Endoglin/CD105 Plasmide Double Nickase (h): sc-400599-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Endoglin/CD105 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Endoglin/CD105 Double Nickase Plasmid (h) e il Endoglin/CD105 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ENG. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Endoglin/CD105 Antibody (P3D1): sc-18838
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Endoglin/CD105 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400599-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Endoglin/CD105 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400599-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ENG codifica endoglin (CD105), un co-recettore transmembrana per i ligandi della superfamiglia del TGF-β che modula l’equilibrio della segnalazione ALK1/ALK5 e la trascrizione a valle dipendente da SMAD. Endoglin è altamente espresso nelle cellule endoteliali in proliferazione e partecipa alla regolazione dell’angiogenesi, del rimodellamento vascolare, della dinamica della matrice extracellulare e della transizione endotelio-mesenchimale. Attraverso interazioni con TGFBR2, ACVRL1 e i complessi di segnalazione associati, CD105 influenza programmi di adesione e migrazione cellulare che determinano l’integrità dei vasi. Una funzione alterata di ENG è collegata alla patobiologia vascolare, inclusa la teleangectasia emorragica ereditaria e i microambienti angiogenici associati ai tumori, rendendolo un bersaglio chiave per studi meccanicistici nella biologia endoteliale.
Endoglin/CD105 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ENG nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ENG. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ENG. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ENG interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.