EMMPRIN/CD147 Plasmídeo de ativação de CRISPR (m): sc-419369-ACT

O gene **Bsg** de camundongo codifica a **EMMPRIN/CD147**, uma glicoproteína amplamente expressa da superfamília das imunoglobulinas que regula interações célula–célula, remodelação da matriz extracelular e acoplamento metabólico em múltiplos tecidos. A CD147 promove a indução de metaloproteinases de matriz e apoia o tráfego de transportadores de monocarboxilato (MCT1/MCT4), conectando o transporte de lactato à reprogramação glicolítica e à dinâmica do microambiente tecidual. Ela participa de processos como o tráfego de leucócitos, a sinalização angiogênica e o crosstalk epitélio–estroma, tornando **Bsg** um nó útil para estudar inflamação, fibrose e interações tumor–estroma. Alterações na atividade da CD147 têm sido associadas à renovação patológica da matriz e a fenótipos invasivos, fornecendo relevância mecanística em modelos de biologia cardiopulmonar, renal e do câncer.

EMMPRIN/CD147 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de Bsg sem alterar a sequência de ADN subjacente.

EMMPRIN/CD147 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus Bsg em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição Bsg, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de EMMPRIN/CD147. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus Bsg nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de EMMPRIN/CD147 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via EMMPRIN/CD147 em células tumorais com expressão de Bsg silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.