Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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EEA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400234-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EEA1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EEA1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EEA1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EEA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EEA1 Anticorpo (G-4): sc-137130
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EEA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400234-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EEA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400234-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EEA1 codifica o antígeno 1 de endossomo precoce (Early Endosome Antigen 1), um efetor de Rab5 que atua como um fator de ancoragem (tethering) necessário para o acoplamento (docking) de endossomos precoces e para a fusão homotípica. Por meio do seu domínio FYVE, a EEA1 liga-se ao fosfatidilinositol 3-fosfato e coordena a identidade da membrana endossomal com eventos de tráfego vesicular, influenciando a endocitose mediada por receptores e a triagem de cargas. A dinâmica endossomal dependente de EEA1 cruza-se com a sinalização de PI3K, a organização do citoesqueleto e a maturação de compartimentos endocíticos que regulam o turnover de receptores de fatores de crescimento. A desregulação do tráfego de endossomos e perturbações no eixo Rab5–EEA1 têm sido associadas a alterações na homeostase de sinalização no câncer e a defeitos endolisossomais implicados em contextos de pesquisa sobre doenças neurodegenerativas e infecciosas.
EEA1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EEA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EEA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EEA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EEA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.