EBF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402438

Visão geral

EBF4 (fator precoce de célula B 4) é um fator de transcrição do tipo hélice–alça–hélice da família EBF que se liga ao DNA para regular programas de expressão gênica associados à especificação do destino celular e à diferenciação tecidual. Ao coordenar redes transcricionais que se cruzam com a regulação da cromatina e com a sinalização do desenvolvimento, o EBF4 pode influenciar processos ligados à linhagem, como a expressão de genes neuronais e relacionados ao sistema imune. A alteração do controle de circuitos transcricionais da família EBF tem sido investigada em contextos que incluem fenótipos do neurodesenvolvimento e reprogramação transcricional associada ao câncer, tornando o EBF4 um nó útil para estudar a diferenciação desregulada. A investigação funcional do EBF4 permite análises mecanísticas de alvos a jusante, da ocupação de promotores/realçadores e de efeitos em nível de via sobre proliferação e identidade celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EBF4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EBF4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EBF4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EBF4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EBF4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EBF4 para a investigação da sinalização de EBF4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EBF4 críticos para a função EBF4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EBF4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo EBF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo EBF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EBF4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo EBF4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR EBF4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EBF4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EBF4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.