Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
E4BP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401353
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- E4BP4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico E4BP4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:E4BP4 Anticorpo (A-9): sc-74415
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
E4BP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401353 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NFIL3 codifica o fator de transcrição E4BP4, do tipo “basic leucine zipper” (bZIP), um regulador dependente do contexto da expressão gênica que integra sinais circadianos a programas imunológicos e metabólicos. O E4BP4 influencia a diferenciação e a função efetora em diferentes linhagens linfoides, incluindo a regulação de redes de citocinas e de vias de sobrevivência, e contribui para o controle homeostático da sinalização inflamatória. Ele também se articula com circuitos transcricionais que moldam respostas ao estresse celular e o timing do desenvolvimento, conectando a regulação rítmica a redes regulatórias gênicas mais amplas. A desregulação da atividade de NFIL3/E4BP4 tem sido associada, em contextos de pesquisa, a patologias mediadas pelo sistema imune, fenótipos hematológicos e alterações metabólicas e circadianas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO E4BP4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NFIL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NFIL3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NFIL3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína E4BP4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NFIL3 para a investigação da sinalização de E4BP4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NFIL3 críticos para a função E4BP4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NFIL3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo E4BP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo E4BP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NFIL3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo E4BP4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR E4BP4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NFIL3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NFIL3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.