Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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E-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419587-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- E-cadherinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase E-cadherin (m) e o Plasmídeo Double Nickase E-cadherin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cdh1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:E-cadherin Anticorpo (G-10): sc-8426
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
E-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419587-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
E-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419587-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Cdh1 de camundongo codifica a E-caderina, uma glicoproteína de adesão célula–célula dependente de Ca2+ que forma junções aderentes por meio de ligação homofílica e conexão ao citoesqueleto de actina via cateninas. A E-caderina ajuda a estabelecer a polaridade epitelial, a integridade da barreira e a morfogênese tecidual, integrando-se a redes de sinalização como as vias Wnt/β-catenina, Hippo e Rho GTPase, que coordenam a tensão nas junções e programas transcricionais. A ruptura da adesão mediada por E-caderina está intimamente associada à transição epitélio-mesenquimal, à migração celular alterada e à perda de diferenciação. Em modelos murinos, a perturbação de Cdh1 é amplamente usada para estudar defeitos do desenvolvimento, homeostase epitelial e mecanismos subjacentes a fenótipos invasivos em contextos relevantes para doenças.
E-cadherin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cdh1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cdh1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cdh1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cdh1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.