Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420081

Übersicht

Das Mausgen **Dvl2** kodiert **Dishevelled 2 (DVL2)**, ein zytoplasmatisches Scaffold-Protein, das Signale von Frizzled-Rezeptoren an nachgeschaltete Wnt-Signalwege weiterleitet. DVL2 verknüpft die kanonische Wnt/β-Catenin-Signalgebung mit nicht-kanonischen Kaskaden der planaren Zellpolarität (PCP) und Wnt/Ca²⁺, indem es rezeptornahe Komplexe koordiniert und die Zytoskelettdynamik, Polarität und den intrazellulären Transport reguliert. Über diese Funktionen trägt DVL2 zur embryonalen Musterbildung, zum Verhalten von Stamm-/Vorläuferzellen und zur Gewebehomöostase bei; eine Fehlregulation wird häufig im Zusammenhang mit aberranter Wnt-Signalgebung untersucht, die mit Entwicklungsdefekten und onkogenen Signalprogrammen verknüpft ist. Dvl2 wird zudem hinsichtlich seiner Effekte auf Zellmigration und Morphogenese erforscht, wobei das Gleichgewicht zwischen β-Catenin-abhängiger Transkription und PCP-Ausgängen entscheidend ist.

Das Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Dvl2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Dvl2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Dvl2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Dvl2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Dvl2-Exone abzielen, die für die Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Dvl2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Dvl2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 HDR-Plasmid (m) und Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Dvl2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Dvl2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.