Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400785

Visão geral

DVL1 codifica a Dishevelled 1 (Dvl-1), uma fosfoproteína citoplasmática que atua como um arcabouço central na transdução de sinais da via Wnt. A Dvl-1 integra sinais proximais ao receptor provenientes de Frizzled e de co-receptores para propagar tanto a sinalização dependente de β-catenina (canônica) quanto a sinalização de polaridade celular planar/Wnt–Ca²⁺ (não canônica), influenciando a polaridade celular, a migração e programas transcricionais. Por meio de seus domínios DIX, PDZ e DEP, a Dvl-1 coordena complexos multiproteicos que regulam a estabilização da β-catenina, a sinalização de pequenas GTPases e a remodelação do citoesqueleto. A desregulação da sinalização Wnt/Dishevelled é frequentemente associada a alterações no padrão de desenvolvimento e à ativação de vias oncogênicas, tornando o DVL1 um nó relevante para estudos mecanísticos de reconfiguração de vias em contextos associados a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DVL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DVL1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DVL1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DVL1 para a investigação da sinalização de Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DVL1 críticos para a função Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DVL1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DVL1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DVL1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DVL1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.