DUSP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405867

概要

DUSP22は、セリン／スレオニン残基およびチロシン残基の脱リン酸化を行う二重特異性ホスファターゼをコードし、キナーゼ駆動型のシグナル伝達ネットワークを調節します。MAPK経路の出力調節や、免疫受容体シグナル伝達のリン酸化依存的制御に関与するとされ、転写プログラム、細胞の活性化状態、アポトーシスに影響を及ぼします。リン酸化ダイナミクスを微調整することで、刺激応答性シグナル伝達が重要な造血系をはじめとする組織における細胞恒常性の維持に寄与します。DUSP22の発現変化や経路コンテキストの変化は、免疫シグナルの破綻や腫瘍形成プロセスと関連づけられており、シグナル伝達駆動性疾患の生物学を研究するうえでの機序的な結節点としての利用を支持します。

DUSP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDUSP22遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DUSP22内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DUSP22のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DUSP22タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DUSP22シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DUSP22欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DUSP22の機能に不可欠なDUSP22エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DUSP22ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DUSP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDUSP22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DUSP22遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DUSP22 HDRプラスミド（h）および DUSP22 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDUSP22ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDUSP22標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。