DOT1L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403286-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DOT1L1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DOT1L1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DOT1L1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DOT1L. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DOT1L1 Anticorpo (E-5): sc-374317
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DOT1L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403286-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DOT1L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403286-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DOT1L codifica a DOT1L1, uma metiltransferase de lisina que catalisa a mono-, di- e tri-metilação da lisina 79 da histona H3 (H3K79), uma marca de cromatina associada à transcrição ativa. Por meio da regulação de programas de expressão gênica, DOT1L influencia a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA, a diferenciação hematopoética e redes transcricionais do desenvolvimento. A metilação de H3K79 dependente de DOT1L se conecta ao controle epigenético do alongamento da RNA polimerase II e da acessibilidade da cromatina, moldando estados transcricionais específicos de linhagem. A atividade desregulada de DOT1L e padrões alterados de metilação de H3K79 estão implicados em programas transcricionais oncogênicos, incluindo os associados a leucemias com rearranjos de MLL, sustentando sua relevância em pesquisas de epigenética e biologia do câncer.
DOT1L1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DOT1L em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DOT1L. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DOT1L. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DOT1L interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.