CRISPRデータではありません：画像はCRISPR実験結果を可視化するための抗体の品質を示しています。
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DGAT2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-416229-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- DGAT2 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- DGAT2ダブルニカースプラスミド（h）およびDGAT2ダブルニカースプラスミド（h2）は、DGAT2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: DGAT2 抗体 (4C1): sc-293211
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
DGAT2 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-416229-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DGAT2 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-416229-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DGAT2（ジアシルグリセロールO-アシルトランスフェラーゼ2）は、小胞体に局在する酵素をコードしており、脂肪酸アシルCoAを用いてジアシルグリセロールをアシル化することで、トリアシルグリセロール合成の最終かつ不可逆的な段階を触媒します。中性脂質産生の中核因子として、DGAT2は脂質滴の形成（バイオジェネシス）を支えるとともに、グリセロ脂質代謝、脂肪酸フラックス、エネルギー貯蔵経路と統合的に関わります。DGAT2活性の変化は、肝臓および脂肪組織における脂質取り扱いの破綻と関連し、脂肪肝（脂肪沈着）、インスリン抵抗性に伴う脂質リモデリング、肥満関連表現型など、代謝疾患の機序研究の文脈で検討されてきました。DGAT2はまた、過剰な脂質負荷下でのリポトキシックストレス応答や小胞体（ER）恒常性を解析するための機能的ノードとしても用いられます。
DGAT2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における DGAT2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、DGAT2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、DGAT2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、DGAT2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。