Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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DEF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405524
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DEF6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DEF6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DEF6 Anticorpo (SW-9): sc-81992
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DEF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405524 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DEF6 (homólogo de “differentially expressed in FDCP 6”) codifica um fator de troca de nucleotídeos de guanina associado ao sistema imune, que coordena a sinalização a jusante dos receptores de antígeno, integrando eventos próximos à membrana com a remodelação da actina e respostas transcricionais. Em linfócitos, o DEF6 modula vias de pequenas GTPases e contribui para a sinalização dependente de Ca²⁺, influenciando a expressão gênica dirigida por NFAT e programas de citocinas que moldam a ativação e a diferenciação. Por meio dessas funções, o DEF6 participa da organização da sinapse imunológica e de uma regulação mais ampla da homeostase imune adaptativa. A atividade ou expressão desregulada de DEF6 tem sido associada a sinalização imune aberrante e à suscetibilidade a patologias imunomediadas, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de regulação imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DEF6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DEF6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DEF6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DEF6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DEF6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DEF6 para a investigação da sinalização de DEF6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DEF6 críticos para a função DEF6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DEF6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DEF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DEF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DEF6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DEF6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DEF6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DEF6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DEF6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.