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DDX3X慢病毒激活颗粒(h) | sc-401253-LAC | 200 µl | $455.00 |
DDX3X 编码一种 ATP 依赖性的 DEAD-box RNA 解旋酶,协调 RNA 代谢的多个阶段,包括 mRNA 输出、翻译起始,以及细胞应激条件下 RNA 颗粒(如应激颗粒)的动态变化。通过与核糖核蛋白复合物及信号通路中间体的相互作用,DDX3X 将转录后调控与控制细胞周期进程、先天免疫感知和应激反应的通路连接起来。DDX3X 活性异常与 RNA 稳态受扰以及增殖、分化程序的异常调控有关,因此在神经发育、病毒宿主因子生物学以及癌症相关转录组重塑研究中具有重要意义。在人类细胞中,DDX3X 是解析 RNA 解旋酶功能如何在基础与应激条件下塑造基因表达输出的关键节点。
DDX3X 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 DDX3X 表达。
DDX3X 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在DDX3X转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性DDX3X表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 DDX3X 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。