DDX33 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404530-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDX33O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDX33 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDX33 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DHX33. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDX33 Anticorpo (B-4): sc-390573
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDX33 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404530-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX33 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404530-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DHX33 (DDX33) codifica uma helicase humana de RNA da família DEAD-box que acopla o remodelamento de RNA dependente de ATP à biogênese de ribossomos e ao metabolismo de RNA. A DDX33 tem sido implicada na função nucleolar, na transcrição/processamento de rRNA e na coordenação da capacidade de tradução com a sinalização proliferativa, conectando a homeostase de RNA à progressão do ciclo celular. Para além de funções de manutenção básica, a DDX33 participa de vias de reconhecimento imune inato ao sustentar a sinalização dependente de RNA e pode influenciar programas transcricionais inflamatórios. A expressão ou atividade desregulada de DDX33 tem sido associada a alterações no controle de crescimento e nas respostas ao estresse em contextos relevantes para o câncer, tornando-a um nó útil para dissecar fenótipos impulsionados por processamento de RNA.
DDX33 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DHX33 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DHX33. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DHX33. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DHX33 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.