DDI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428086
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDI1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DDI1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-428086 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O DDI1 de camundongo (DNA damage-inducible 1 homolog) codifica uma proteína conservada implicada na proteostase dependente de ubiquitina por meio de seus domínios tipo ubiquitina (ubiquitin-like) e associado à ubiquitina (ubiquitin-associated), além de uma região semelhante a protease retroviral. O DDI1 tem sido relacionado à regulação do turnover proteico, à adaptação ao estresse e ao crosstalk com respostas a danos no DNA, em consonância com funções na manutenção do controle de qualidade de proteínas e da homeostase celular. A perturbação de vias associadas ao DDI1 pode influenciar o acúmulo de proteínas ubiquitinadas e os desfechos de sinalização de estresse, relevantes para modelos de neurodegeneração, biologia do câncer e respostas inflamatórias. Em sistemas murinos, o DDI1 oferece um ponto de estudo tratável para investigar como vias mediadas por ubiquitina se interseccionam com a estabilidade do genoma e o estresse proteotóxico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DDI1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ddi1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ddi1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ddi1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DDI1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ddi1 para a investigação da sinalização de DDI1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ddi1 críticos para a função DDI1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ddi1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DDI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo DDI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ddi1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DDI1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR DDI1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ddi1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ddi1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.