DC-SIGN Plasmide Double Nickase (h): sc-401368-NIC

CD209 codifica DC-SIGN (CD209), un recettore lectinico di tipo C espresso principalmente sulle cellule dendritiche e su alcune popolazioni di macrofagi, che lega glicani ad alto contenuto di mannosio e glicani fucosilati presenti su microrganismi e su ligandi endogeni. Attraverso il riconoscimento dei carboidrati dipendente dal calcio e la trasduzione del segnale mediata da adattatori associati, DC-SIGN modula la captazione dell’antigene, l’endocitosi e vie a valle come NF-κB e la segnalazione dipendente da Raf-1, che plasmano le risposte citochiniche e il priming delle cellule T. Questo recettore contribuisce al riconoscimento dei patogeni e alla regolazione immunitaria nei tessuti mucosali e periferici, influenzando il traffico leucocitario e l’adesione cellula-cellula tramite interazioni con membri della famiglia ICAM. Alterazioni dell’attività e dell’espressione di DC-SIGN sono state associate a differenze nella suscettibilità alle infezioni e a fenotipi immunitari infiammatori, rendendo CD209 un bersaglio rilevante per studi di immunologia meccanicistica.

DC-SIGN Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD209 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD209. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD209. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD209 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.