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DAGLα慢病毒激活颗粒(h) | sc-402826-LAC | 200 µl | $455.00 |
二酰甘油脂肪酶α(diacylglycerol lipase alpha,DAGLA;DAGLα)是一种与膜相关的丝氨酸水解酶,可催化二酰甘油转化为2‑花生四烯酰甘油(2‑AG),后者是主要的内源性大麻素脂质信使。通过调控2‑AG的可用性,DAGLα有助于塑造逆行性突触信号传递及其下游的大麻素受体通路,从而影响神经元兴奋性与突触可塑性。DAGLA活性还与脂质信号网络相互衔接,将磷脂酶C生成的二酰甘油与更广泛的炎症与代谢程序联系起来。内源性大麻素张力失衡以及与DAGLA相关的脂质信号异常,已在神经发育与神经精神表型,以及疼痛与神经炎症过程等背景下被研究,支持其在机制研究中的相关性。
DAGLα 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 DAGLA 表达。
DAGLα 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在DAGLA转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性DAGLα表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 DAGLA 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。