Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Cytoplasmic CysRS Antibody (A-3): sc-390230. Western blot analysis of Cytoplasmic CysRS expression in U266 (A), F9 (B), A-10 (C), NIH/3T3 (D), RAW 264.7 (E) and BXPC-3 (F) whole cell lysates.
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Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406444
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Cytoplasmic CysRS基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cytoplasmic CysRS: sc-390230，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406444 | 20 µg | $397.00 |
概述
CARS 编码细胞质半胱氨酰‑tRNA 合成酶（CysRS），属于 I 类氨酰‑tRNA 合成酶，负责将半胱氨酸连接到其对应的 tRNA 上，从而在细胞质中保障翻译保真性。通过调控带电的 tRNA^Cys 供给，细胞质 CysRS 支持全局蛋白质合成，并将氨基酸可用性与蛋白质稳态（proteostasis）通路相耦联，其中包括调节翻译的应激反应。氨酰‑tRNA 合成酶活性的扰动可改变核糖体动力学并触发整合性应激信号传导，进而影响细胞生长、代谢以及依赖半胱氨酸利用的氧化还原敏感过程。tRNA 充电与翻译质量控制的失调与神经发育和神经肌肉表型、增殖性疾病以及细胞应激适应等研究方向相关。
Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CARS基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CARS基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CARS开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Cytoplasmic CysRS蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CARS缺失的细胞模型，用于Cytoplasmic CysRS信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Cytoplasmic CysRS 功能至关重要的 CARS 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CARS 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Cytoplasmic CysRS CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CARS 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Cytoplasmic CysRS HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Cytoplasmic CysRS HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CARS同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CARS靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。