
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
CYP2D6 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-404098-ACT | 20 µg | $397.00 |
CYP2D6는 소포체 내에서 다양한 내인성 기질과 외인성 물질(제노바이오틱스)의 산화적 생체전환을 촉매하는 미소체 단일산소화효소인 시토크롬 P450 2D6를 암호화한다. 시토크롬 P450 의존성 대사 네트워크의 일부로서, CYP2D6는 CYP450 환원효소를 통한 산화환원 순환과 NADPH 의존적 전자 전달에 영향을 미쳐, 세포가 생리활성 대사산물에 노출되는 양상을 좌우한다. CYP2D6의 유전적 변이와 맥락(상황) 의존적 발현은 약물 대사 및 화학물질 감수성에서 개인 간 차이를 결정하는 주요 요인이다. 따라서 CYP2D6 활성의 조절 이상은 약물유전체학 연구, 독성학, 그리고 대사적 활성화 및 제거(클리어런스)의 기전 모델과 관련이 크다.
CYP2D6 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 CYP2D6 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
CYP2D6 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 CYP2D6 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 CYP2D6 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 CYP2D6 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 CYP2D6 위치를 보존하고 내인성 위치에서 CYP2D6 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 CYP2D6 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 CYP2D6 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.