Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CYP27A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402836-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYP27A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CYP27A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CYP27A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CYP27A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CYP27A1 Anticorpo (G-2): sc-390974
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYP27A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402836-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP27A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402836-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CYP27A1 humano codifica a esterol 27-hidroxilase, uma enzima mitocondrial do citocromo P450 que catalisa a oxidação do colesterol e de intermediários esteroides durante a biossíntese de ácidos biliares. Ao gerar esteróis 27-hidroxilados, o CYP27A1 dá suporte ao catabolismo mitocondrial de esteróis, contribui para a homeostase lipídica e se integra às vias hepáticas de ácidos biliares, ao transporte de colesterol e à sinalização por oxiesteróis. Alterações na atividade do CYP27A1 afetam a composição de esteróis e de ácidos biliares e têm sido associadas a erros inatos do metabolismo de ácidos biliares, como a xantomatose cerebrotendinosa, com efeitos a jusante sobre a deposição de colesterol e o manejo de esteróis nos tecidos. Por isso, o CYP27A1 é amplamente estudado em biologia metabólica, na função do P450 mitocondrial e na regulação de redes de receptores nucleares mediada por oxiesteróis.
CYP27A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYP27A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYP27A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYP27A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYP27A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.