Date published: 2026-7-11

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CYP21A2慢病毒激活颗粒(h): sc-402919-LAC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
  • CYP21A2 慢病毒激活颗粒(h)是一种协同激活介质(SAM)转录激活系统,通过细胞慢病毒转导,特异高效地上调目的基因的表达
  • CYP21A2慢病毒激活颗粒(h)包含以下SAM激活元素:一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了转录活化域VP64;一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白;一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素,潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
  • 一经转导,形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域,为高效激活基因,招募转录因子
  • 由 CYP21A2 慢病毒激活质粒 (h) 和 CYP21A2 慢病毒激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 靶向 CYP21A2 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
  • 转染后,基因激活效率可以用抗体:CYP21A2 Antibody (B-7): sc-518265,通过WB、IF或IHC分析
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    CYP21A2慢病毒激活颗粒(h)

    sc-402919-LAC
    200 µl
    $455.00

    CYP21A2 编码细胞色素 P450 21-羟化酶,这是一种与内质网相关的单加氧酶,在肾上腺类固醇生成过程中催化关键的 21-羟化步骤,包括将孕酮和 17α-羟孕酮转化并导向盐皮质激素和糖皮质激素的生物合成。该酶在血红素依赖的 P450 氧化还原化学反应体系中发挥作用,并整合于由胆固醇衍生的激素通路之中,这些通路共同塑造肾上腺分区(分带)、内分泌反馈以及细胞代谢状态。CYP21A2 活性改变与先天性肾上腺皮质增生(CAH)的多种表型密切相关,为在相关细胞模型中研究类固醇前体的堆积、皮质醇/醛固酮生成受损及其下游信号效应提供了分子切入点。由于 CYP21A2 位于一个复杂的基因组区域,邻近高度同源的假基因 CYP21A1P,在机制研究中往往需要对该位点进行精确、特异性的调控与解析。

    CYP21A2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CYP21A2 表达。

    CYP21A2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CYP21A2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CYP21A2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CYP21A2 基因组位点和调控架构。

    慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。