Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CYP21A2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-402919-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- CYP21A2 as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- CYP21A2 As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo CYP21A2 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo CYP21A2 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor CYP21A2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: CYP21A2 Anticorpo (B-7): sc-518265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYP21A2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-402919-LAC | 200 µl | $455.00 |
CYP21A2 codifica a 21-hidroxilase do citocromo P450, uma mono-oxigenase associada ao retículo endoplasmático que catalisa etapas-chave de 21-hidroxilação na esteroidogênese adrenal, incluindo a conversão de progesterona e 17α-hidroxiprogesterona em direção à biossíntese de mineralocorticoides e glicocorticoides. Essa enzima atua na química redox dependente de heme do sistema P450 e está integrada a vias hormonais derivadas do colesterol que moldam a zonação adrenal, o feedback endócrino e o estado metabólico celular. Alterações na atividade de CYP21A2 estão fortemente associadas a fenótipos de hiperplasia adrenal congênita e oferecem um ponto de entrada molecular para estudar o acúmulo de precursores esteroides, a produção prejudicada de cortisol/aldosterona e os efeitos de sinalização a jusante em modelos celulares relevantes. Como o CYP21A2 se localiza em uma região genômica complexa próxima ao pseudogene altamente homólogo CYP21A1P, a investigação precisa da regulação específica do locus costuma ser importante para estudos mecanísticos.
As Partículas de Ativação Lentivirais CYP21A2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de CYP21A2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais CYP21A2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição CYP21A2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de CYP21A2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo CYP21A2 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.