CYFIP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-429445

概要

Cyfip2 は、細胞質エフェクターである CYFIP2 をコードしており、WAVE 制御複合体および FMRP 関連リボヌクレオタンパク質複合体との相互作用を介して、Rac1 シグナル伝達をアクチン細胞骨格の再構築と翻訳制御に結び付けます。ニューロンでは、CYFIP2 は、Arp2/3 によるアクチン重合と活動依存的なタンパク質合成を協調させることで、成長円錐の動態、樹状突起スパインの成熟、シナプス可塑性に寄与します。これらの過程により CYFIP2 は、細胞骨格の構築と RNA 代謝の接点に位置付けられ、神経回路の結合性および興奮性シナプス機能を支える経路と関連付けられます。CYFIP2 活性の変化は、遺伝学的および機能的研究において神経発達表現型や発作関連の感受性と関連することが示されており、マウス系での機構モデリングにおける重要性が支持されています。

CYFIP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCyfip2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cyfip2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cyfip2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CYFIP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CYFIP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cyfip2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CYFIP2の機能に不可欠なCyfip2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cyfip2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CYFIP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCYFIP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cyfip2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CYFIP2 HDRプラスミド（m）および CYFIP2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCyfip2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCyfip2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。