cyclin Y Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426856
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cyclin Y O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico cyclin Y, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cyclin Y Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426856 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Ccny de camundongo codifica a ciclina Y, uma ciclina associada à membrana que coordena a sinalização ligada ao ciclo celular com programas de desenvolvimento e metabólicos. A ciclina Y tem sido implicada na regulação da atividade de CDKs e na modulação da via Wnt/β-catenina por meio do controle de componentes de sinalização na membrana plasmática, influenciando proliferação, diferenciação e homeostase tecidual. A expressão de Ccny e a dinâmica de sinalização dirigida por ciclinas são estudadas em contextos como o comportamento de células-tronco/progenitoras, o desenvolvimento neuronal e o remodelamento de tecidos, nos quais o controle do ciclo celular desregulado e a sinalização Wnt são características comuns. Assim, modelos de perda de função de Ccny são úteis para dissecar a regulação de checkpoints dependentes de ciclinas, o crosstalk entre vias e fenótipos relevantes para a biologia do câncer e a pesquisa em neurodesenvolvimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cyclin Y (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccny em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccny, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccny na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cyclin Y.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccny para a investigação da sinalização de cyclin Y, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccny críticos para a função cyclin Y
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccny para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo cyclin Y Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo cyclin Y Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccny. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo cyclin Y Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR cyclin Y (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccny para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccny definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.