Crossveinless-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406614
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Crossveinless-2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Crossveinless-2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Crossveinless-2 Anticorpo (G-8): sc-377502
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Crossveinless-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406614 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
BMPER codifica a glicoproteína secretada da matriz extracelular Crossveinless-2, um regulador dependente do contexto da sinalização de proteínas morfogenéticas ósseas (BMP). Ao se ligar a ligantes BMP e modular sua disponibilidade para os receptores de BMP, a BMPER influencia programas transcricionais dependentes de SMAD que controlam o comportamento endotelial, a morfogênese tecidual e a remodelação da matriz extracelular. A atividade de BMPER se cruza com vias de desenvolvimento e de homeostase vascular e tem sido associada na literatura a sinalização angiogênica desregulada e a fenótipos de tecido conjuntivo quando é perturbada. Essas propriedades tornam a BMPER um alvo útil para estudar a formação de gradientes de BMP, o sequestro de ligantes e o ajuste fino da via em modelos celulares e de organoides.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Crossveinless-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BMPER em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BMPER, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BMPER na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Crossveinless-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BMPER para a investigação da sinalização de Crossveinless-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BMPER críticos para a função Crossveinless-2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BMPER para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Crossveinless-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Crossveinless-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BMPER. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Crossveinless-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Crossveinless-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BMPER para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BMPER definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.