CREB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400160-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CREB1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CREB1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CREB1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CREB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CREB1 Anticorpo (X-12): sc-240
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CREB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400160-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CREB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400160-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CREB1 codifica a proteína 1 de ligação ao elemento de resposta ao cAMP (CREB1), um fator de transcrição bZIP que se liga a motivos CRE para coordenar a expressão gênica dependente de estímulos. CREB1 integra sinalização das vias cAMP/PKA, quinases Ca2+/calmodulina e MAPK/ERK, moldando programas envolvidos em plasticidade neuronal, metabolismo, controle do ciclo celular e respostas ao estresse. Por meio do recrutamento de coativadores dependente de fosforilação (por exemplo, CBP/p300), CREB1 modula a cromatina e os resultados transcricionais em diversos tipos celulares. A atividade desregulada de CREB1 tem sido associada a alterações na sinalização imune e inflamatória, fenótipos neuropsiquiátricos e redes transcricionais oncogênicas, tornando-o um nó amplamente utilizado em estudos de vias e de mecanismos de doença.
CREB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CREB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CREB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CREB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CREB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.