creatine kinase-M CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h2): sc-401132-KO-2

개요

CKM은 크레아틴 키나아제-M(creatine kinase-M, CK-M)을 암호화하며, CK-M은 세포질에 존재하는 인산기 전달효소로서 포스포크레아틴에서 ADP로 인산기를 가역적으로 전달해 ATP를 재생함으로써, 수요 변동 시 세포의 에너지 상태(energy charge)를 완충합니다. CK-M은 골격근과 심장근에 매우 풍부하게 발현되며, 근섬유에서 해당과정, 산화적 인산화, 그리고 포스포크레아틴 셔틀을 통한 에너지 수송과 연계되어 ATP 항상성을 유지하는 데 기여합니다. CKM 활성의 교란은 근수축성과 대사 스트레스 반응에 영향을 주며, 근병증, 근손상, 심장-대사 재형성 연구에서 자주 평가됩니다. CKM은 또한 횡문근 모델에서 에너지 적응, 미토콘드리아 기능, 산화환원(redox) 연관 신호전달을 규명하기 위한 기전적 핵심 노드로 활용됩니다.

creatine kinase-M CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)는 human 세포주에서 CKM 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CKM 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CKM의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 creatine kinase-M 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 creatine kinase-M 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CKM 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• creatine kinase-M 기능에 중요한 CKM 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CKM 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• creatine kinase-M CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 creatine kinase-M CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CKM 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  creatine kinase-M HDR 플라스미드 (h) 및 creatine kinase-M HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CKM 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CKM 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.