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CRABP-II双切口酶质粒(h) | sc-402978-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRABP-II双切口酶质粒(h2) | sc-402978-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRABP2 编码细胞视黄酸结合蛋白 II(CRABP-II),这是一种高亲和力的细胞质载体,可结合全反式视黄酸(all-trans retinoic acid),并调控其在细胞内的可用性以及向细胞核的递送。CRABP-II 通过将视黄酸“导流”至视黄酸受体(RARs),影响调控分化、增殖、上皮稳态以及与屏障相关基因表达的转录程序。CRABP2 依赖的类维生素 A(视黄类)信号与细胞周期控制、炎症和发育模式形成等通路相互交叉,因此是解析情境特异性视黄酸反应的一个有用节点。在多种肿瘤、皮肤病学与代谢研究背景中均有报道 CRABP2 表达及视黄类物质处理发生改变,支持对分化失调与转录可塑性异常的研究。
CRABP-II 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CRABP2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CRABP2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CRABP2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CRABP2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。