CPSF4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403190

概要

CPSF4（cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4）は、ポリアデニル化シグナルを認識し、切断およびpoly(A)テール付加を協調して進めるmRNA 3′末端プロセシング機構の中核構成要素をコードします。CPSF4は、切断・ポリアデニル化複合体における役割を通じて、転写産物の成熟、選択的ポリアデニル化、ならびに遺伝子発現量の制御に寄与し、mRNAの安定性や翻訳にも影響を与えます。3′末端プロセシング因子が攪乱されるとpoly(A)部位の利用が変化し、転写ネットワークが広範に再編成され得ることから、CPSF4に関連する生物学は細胞周期制御、ストレス応答、分化プログラムと結び付いています。がんをはじめとする増殖性の病態や神経発達の文脈では、RNAプロセシングの異常や選択的ポリアデニル化がしばしば観察されるため、CPSF4は機序解明研究において重要なノードとなります。

CPSF4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCPSF4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CPSF4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CPSF4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CPSF4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CPSF4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CPSF4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CPSF4の機能に不可欠なCPSF4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CPSF4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CPSF4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCPSF4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CPSF4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CPSF4 HDRプラスミド（h）および CPSF4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCPSF4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCPSF4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。