COX5b CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405159

概要

COX5Bは、シトクロムcオキシダーゼサブユニット5B（COX5b）をコードする遺伝子であり、ミトコンドリア複合体IVの核コード成分の一つです。COX5bは、シトクロムcから分子状酸素への電子伝達を支えるとともに、ミトコンドリア内膜を介したプロトンポンプ機能にも寄与します。酸化的リン酸化の効率を調節することで、COX5bは細胞内ATP産生、レドックスバランス、ミトコンドリア膜電位に影響を与え、ミトコンドリア生合成やストレス応答を協調する経路と統合的に関わります。複合体IV機能およびCOX5B発現の変化は、ミトコンドリア機能不全に関連する文脈でしばしば研究されており、神経変性における生体エネルギーのリモデリング、心血管・代謝疾患、腫瘍代謝などがその例です。COX5Bはまた、呼吸鎖の組み立て、活性酸素種（ROS）シグナル伝達、ミトコンドリア—核間クロストークの研究におけるマーカー遺伝子としても用いられます。

COX5b CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCOX5B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、COX5B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、COX5Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、COX5bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、COX5bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、COX5B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• COX5bの機能に不可欠なCOX5Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、COX5Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• COX5b CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCOX5b CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、COX5B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  COX5b HDRプラスミド（h）および COX5b HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCOX5Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCOX5B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。