COX11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405874

概要

COX11は、シトクロムc酸化酵素（複合体IV）の生合成に必須なミトコンドリア内膜タンパク質をコードしており、COX1の触媒コアへ銅を受け渡すのを助ける銅メタロシャペロンとして機能します。この役割を通じて、COX11は酸化的リン酸化、電子伝達、細胞内ATP産生を支え、下流ではミトコンドリア膜電位やレドックス恒常性にも影響を及ぼします。COX11依存的なアセンブリが破綻すると、呼吸能が低下し、二次的に活性酸素種（ROS）シグナル伝達や代謝ストレス応答にも変化が生じ得ます。複合体IV機能の変化やミトコンドリアのプロテオスタシスは、神経筋疾患や神経変性表現型、ならびにがん細胞の代謝リモデリングとの関連でしばしば研究対象となっています。

COX11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCOX11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、COX11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、COX11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、COX11タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、COX11シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、COX11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• COX11の機能に不可欠なCOX11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、COX11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• COX11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCOX11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、COX11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  COX11 HDRプラスミド（h）および COX11 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCOX11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCOX11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。