COL15A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404027

Visão geral

COL15A1 codifica a cadeia alfa 1 do colágeno tipo XV, um colágeno não fibrilar localizado na membrana basal e na matriz extracelular pericelular, onde sustenta a arquitetura tecidual e a comunicação célula–matriz. Ao contribuir para a montagem e a remodelação da matriz extracelular, COL15A1 influencia programas de adesão, migração e mecanotransdução que se cruzam com a sinalização de integrina/FAK e com a disponibilidade de fatores de crescimento regulada pela matriz. A expressão alterada de COL15A1 está associada a mudanças na organização do estroma, no comportamento de nichos angiogênicos e em fenótipos invasivos observados em múltiplos contextos de doença, incluindo a biologia do câncer e patologias associadas ao sistema vascular. Como componente da matriz extracelular, COL15A1 é frequentemente estudado pelo seu papel na regulação microambiental do comportamento de células epiteliais e endoteliais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO COL15A1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene COL15A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do COL15A1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do COL15A1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína COL15A1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de COL15A1 para a investigação da sinalização de COL15A1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) COL15A1 críticos para a função COL15A1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos COL15A1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo COL15A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo COL15A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus COL15A1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo COL15A1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR COL15A1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia COL15A1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo COL15A1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.