CNG-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419713
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CNG-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CNG-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CNG-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419713 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cnga1 codifica a subunidade alfa do canal regulado por nucleotídeos cíclicos CNG-1, um componente essencial da maquinaria de fototransdução nos fotorreceptores do tipo bastonete (rods) de camundongo. Ao formar canais catiônicos regulados por cGMP na membrana plasmática do segmento externo, o CNG-1 conecta alterações no cGMP induzidas pela luz ao influxo de Na⁺/Ca²⁺, moldando o potencial de membrana e a sinalização sináptica a jusante. A função desse canal se integra ao metabolismo do cGMP, à homeostase de Ca²⁺ e a mecanismos de adaptação que regulam a sensibilidade visual. A interrupção da sinalização dependente de CNGA1 está associada à disfunção de bastonetes e a fenótipos de degeneração retiniana, tornando-a relevante para estudos sobre mecanismos de doenças retinianas hereditárias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CNG-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cnga1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cnga1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cnga1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CNG-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cnga1 para a investigação da sinalização de CNG-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cnga1 críticos para a função CNG-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cnga1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CNG-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CNG-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cnga1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CNG-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CNG-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cnga1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cnga1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.