Clusterin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419695
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Clusterin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Clusterin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Clusterin-α Anticorpo (A-11): sc-166831
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Clusterin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419695 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Mouse Clu codifica a clusterina, uma glicoproteína secretada e associada à matriz extracelular que atua como chaperona molecular e fator de ligação a lipídios, implicada na proteostase, na regulação do complemento e na depuração de detritos celulares. A clusterina participa de processos responsivos ao estresse, incluindo a modulação da apoptose, a adaptação ao estresse oxidativo e a remodelação de membranas, e tem sido associada a vias que governam a inflamação e a homeostase extracelular. No sistema nervoso e em outros tecidos, a CLU é frequentemente estudada por seus papéis na dinâmica de agregação proteica e na sinalização glial ou imune. A expressão ou a função desregulada de CLU tem sido associada à neurodegeneração, ao estresse metabólico e à biologia tumoral, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de lesão tecidual e estados inflamatórios crônicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Clusterin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Clu em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Clu, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Clu na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Clusterin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Clu para a investigação da sinalização de Clusterin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Clu críticos para a função Clusterin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Clu para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Clusterin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Clusterin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Clu. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Clusterin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Clusterin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Clu para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Clu definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.