CLPTM1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425178-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLPTM1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CLPTM1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CLPTM1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Clptm1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CLPTM1 Anticorpo (G-7): sc-374619
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLPTM1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425178-NIC | 20 µg | $410.00 |
Clptm1 codifica a CLPTM1, uma proteína transmembranar de múltiplas passagens predominantemente localizada em membranas intracelulares, incluindo o retículo endoplasmático, onde se acredita que contribua para o tráfego de proteínas de membrana e para respostas ao estresse celular. Em camundongos e em outros sistemas de mamíferos, a CLPTM1 tem sido associada à regulação da expressão na superfície celular de receptores e canais iônicos, implicando-a em processos como a sinalização sináptica e a adaptação celular a desafios de proteostase. A expressão alterada de CLPTM1 foi associada a fenótipos relacionados ao câncer e a vias de resposta a fármacos em diversos contextos de modelo, sustentando a investigação de seus papéis na sinalização de sobrevivência e na sensibilidade celular a estressores. Estudos funcionais frequentemente se concentram em como a CLPTM1 influencia a organização de membranas, o transporte e redes de sinalização downstream relevantes para a biologia neurológica e oncogênica.
CLPTM1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Clptm1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Clptm1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Clptm1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Clptm1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.