CLN1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422390

개요

Ppt1는 팔미토일-단백질 티오에스터레이스 1(CL N1)을 암호화하며, 이는 리소좀에 존재하는 탈팔미토일화 효소로서 S-팔미토일화 단백질에 티오에스터 결합으로 연결된 지방산 아실기를 제거하여 단백질의 분해(턴오버)와 수송을 돕습니다. CLN1은 리소좀 단백질 항상성(proteostasis), 막 단백질 재활용, 지질 처리 조절을 통해 신경세포 항상성을 유지하고, 자가포식–리소좀 경로와도 교차합니다. CLN1 활성의 소실은 리소좀 분해 장애와 분열하지 않는 조직에서의 저장 물질 축적을 특징으로 하는 신경세포 세로이드 리포푸스시노증(neuronal ceroid lipofuscinosis) 병태생리와 연관됩니다. 마우스 시스템에서 Ppt1 교란은 탈팔미토일화 이상이 시냅스 유지, 신경염증 신호, 그리고 리소좀 의존적 품질 관리에 미치는 영향을 연구할 수 있는 다루기 쉬운 모델을 제공합니다.

CLN1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ppt1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ppt1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ppt1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CLN1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CLN1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ppt1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CLN1 기능에 중요한 Ppt1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ppt1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CLN1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CLN1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ppt1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CLN1 HDR 플라스미드 (m) 및 CLN1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ppt1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ppt1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.