CLK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419688
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLK1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CLK1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CLK1 Anticorpo (F-12): sc-515897
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419688 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Clk1 codifica a quinase 1 semelhante à CDC (CLK1), uma proteína quinase de dupla especificidade que fosforila fatores de splicing ricos em serina/arginina (SR) e ajuda a controlar a dinâmica do spliceossoma. Por meio da modulação do splicing alternativo e do processamento de pré-mRNA, a CLK1 contribui para programas transcricionais que regulam a progressão do ciclo celular, a diferenciação e a expressão gênica adaptativa ao estresse. A atividade da CLK1 se cruza com redes de sinalização que ajustam o processamento de RNA, incluindo vias responsivas ao estresse celular e a sinais de crescimento, influenciando assim a diversidade do proteoma. A atividade desregulada das quinases da família CLK e padrões aberrantes de splicing têm sido implicados em múltiplos fenótipos relevantes para doenças, tornando o Clk1 de camundongo um ponto útil para estudos mecanísticos do processamento de RNA no desenvolvimento e na patologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CLK1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Clk1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Clk1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Clk1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CLK1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Clk1 para a investigação da sinalização de CLK1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Clk1 críticos para a função CLK1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Clk1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CLK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CLK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Clk1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CLK1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CLK1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Clk1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Clk1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.