claudin-11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401859
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- claudin-11 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico claudin-11, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:claudin-11 Anticorpo (D-8): sc-271232
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
claudin-11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401859 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CLDN11 codifica a claudina-11, uma proteína de junções estreitas (tight junctions) com quatro domínios transmembrana que forma barreiras paracelulares e regula a permeabilidade seletiva em epitélios especializados. A claudina-11 é um componente-chave da arquitetura das fitas de junção estreita em células da glia mielinizante e nas junções das células de Sertoli nos testículos, sustentando a polaridade celular e a compartimentalização tecidual. Por meio dos processos de montagem das tight junctions e de manutenção da barreira, o CLDN11 influencia a integridade epitelial, a homeostase iônica e a sinalização de adesão célula–célula. Alterações na expressão de CLDN11 ou na organização das junções são estudadas em contextos de disfunção de barreira e diferenciação desregulada, com relevância para a biologia da mielinização do sistema nervoso e para a homeostase de tecidos reprodutivos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO claudin-11 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CLDN11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CLDN11, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CLDN11 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína claudin-11.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CLDN11 para a investigação da sinalização de claudin-11, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CLDN11 críticos para a função claudin-11
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CLDN11 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo claudin-11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo claudin-11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CLDN11. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo claudin-11 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR claudin-11 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CLDN11 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CLDN11 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.