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Cks1双切口酶质粒(h) | sc-403019-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cks1双切口酶质粒(h2) | sc-403019-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 CKS1B 基因编码 Cks1,这是一种保守的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)调控亚基,可将 CDK 复合物与 SCF^SKP2 E3 泛素连接酶的活性耦联起来,促进细胞周期按时转换。通过促进 p27^Kip1 等 CDK 抑制因子的泛素化与降解,Cks1 有助于在增殖信号驱动下协调 G1/S 期推进、DNA 复制能力的建立以及检查点恢复。CKS1B 表达失调常与蛋白稳态改变和异常增殖程序相关,因此在研究致癌性细胞周期调控与基因组稳定性时具有重要意义。由此,Cks1 常被用于探究连接 CDK 信号、泛素介导降解以及复制应激反应的相关通路。
Cks1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CKS1B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CKS1B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CKS1B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CKS1B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。