Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Chx10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401103
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Chx10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Chx10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Chx10 Anticorpo (E-12): sc-365519
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Chx10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401103 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
VSX2 (Chx10) é um fator de transcrição homeobox que desempenha um papel central na especificação do campo ocular e na proliferação de células progenitoras da retina, ajudando a coordenar a neurogênese e as decisões de destino celular durante a retinogênese dos vertebrados. Ele regula programas transcricionais que controlam o desenvolvimento de neurônios bipolares da retina e a manutenção da identidade da retina neural, interagindo com redes de sinalização do desenvolvimento como WNT/β-catenina, SHH e a regulação gênica associada ao Notch. Alterações na função de VSX2 têm sido associadas a malformações oculares congênitas, incluindo microftalmia e anoftalmia, e a expressão desregulada é relevante para estudos de mecanismos de distrofia retiniana e para o desenvolvimento de organoides de retina derivados de células-tronco. Como regulador de ligação ao DNA, Chx10 é comumente investigado por seus efeitos em trajetórias de diferenciação, comprometimento de linhagem e redes regulatórias gênicas em modelos oculares e neurais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Chx10 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene VSX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do VSX2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do VSX2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Chx10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de VSX2 para a investigação da sinalização de Chx10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) VSX2 críticos para a função Chx10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos VSX2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Chx10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Chx10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus VSX2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Chx10 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Chx10 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia VSX2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo VSX2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.