Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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ChREBP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401803-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- ChREBP as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- ChREBP As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo ChREBP Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo ChREBP Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor MLXIPL. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: ChREBP Anticorpo (G-12): sc-515922
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ChREBP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-401803-LAC | 200 µl | $455.00 |
MLXIPL codifica a proteína de ligação ao elemento responsivo a carboidratos (ChREBP), um fator de transcrição sensor de glicose que conecta o fluxo intracelular de carboidratos a programas gênicos que controlam a glicólise, a lipogênese de novo e a síntese de triglicerídeos. Em resposta a metabólitos de carboidratos, a ChREBP transloca-se para o núcleo e se liga a elementos de resposta a carboidratos para regular enzimas metabólicas e transportadores, integrando o estado nutricional às vias de armazenamento de energia no fígado e no tecido adiposo. Esse eixo regulatório se cruza com a sinalização da insulina, a modulação pela proteína quinase ativada por AMP (AMPK) e redes transcricionais mais amplas que governam a homeostase lipídica. A atividade desregulada de ChREBP tem sido associada a fenótipos metabólicos relevantes para esteatose hepática, resistência à insulina e risco cardiometabólico, tornando MLXIPL um ponto útil para estudos mecanísticos de regulação gênica dirigida por nutrientes.
As Partículas de Ativação Lentivirais ChREBP (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de MLXIPL numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais ChREBP (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição MLXIPL, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de ChREBP. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo MLXIPL e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.