ChM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403523

Visão geral

CNMD codifica a condromodulina-1 (ChM-1), uma glicoproteína secretada derivada da cartilagem, implicada na manutenção do microambiente avascular da cartilagem ao modular o comportamento das células endoteliais e a homeostase da matriz extracelular. A ChM-1 está associada a programas de diferenciação condrogênica e a processos de remodelação tecidual que coordenam a deposição de matriz, a adesão celular e a sinalização local de fatores de crescimento em tecidos musculoesqueléticos. Alterações na expressão de CNMD foram relatadas em contextos de degeneração e reparo da cartilagem, sustentando seu uso como ponto de entrada molecular para o estudo da biologia osteoarticular. Além disso, a atividade de CNMD/ChM-1 é relevante para investigações sobre supressão da angiogênese e sinalização regulada pela matriz no desenvolvimento e na remodelação tecidual associada a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ChM-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CNMD em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CNMD, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CNMD na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ChM-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CNMD para a investigação da sinalização de ChM-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CNMD críticos para a função ChM-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CNMD para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ChM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ChM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CNMD. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ChM-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ChM-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CNMD para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CNMD definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.