CHD1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404299-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CHD1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CHD1 Double Nickase Plasmid (h) e il CHD1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CHD1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CHD1 Antibody (C-8): sc-271626
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CHD1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404299-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CHD1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404299-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHD1 (chromodomain helicase DNA binding protein 1) è un rimodellatore della cromatina ATP-dipendente che riconosce segni istonici metilati tramite i suoi cromodomini e riposiziona i nucleosomi per modulare l’accessibilità della cromatina. Supporta la regolazione trascrizionale, l’elongazione della RNA polimerasi II e il mantenimento di una cromatina aperta a livello di promotori attivi e dei corpi genici, collegandosi così a processi quali la replicazione del DNA, la risposta al danno al DNA e la stabilità del genoma. La funzione di CHD1 si intreccia con l’organizzazione della cromatina e con vie di controllo epigenetico che influenzano l’identità cellulare e i programmi di differenziamento. Alterazioni dell’attività o dello stato genomico di CHD1 sono state associate a deregolazione trascrizionale e a fenotipi di instabilità genomica rilevanti per la biologia del cancro e per meccanismi patologici correlati guidati dalla cromatina.
CHD1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CHD1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CHD1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CHD1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CHD1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.