CHCHD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425817

概要

Chchd6はCHCHD6をコードしており、CHCHD6はコイルドコイル‐ヘリックス‐コイルドコイル‐ヘリックス（CHCH）ドメインを有するタンパク質で、ミトコンドリアに多く局在し、ミトコンドリア内膜の組織化とクリステ構造の維持を担います。CHCHD6は、膜の曲率、呼吸鎖の組み立て、ミトコンドリアダイナミクスを協調して制御する、ミトコンドリア接触部位およびクリステ形成制御系（MICOS）に関連するプロセスとの関与が示されています。これらの役割を通じて、CHCHD6は酸化的リン酸化の効率、活性酸素種（ROS）のバランス、ならびに細胞の生存や分化プログラムに影響し得るミトコンドリアストレスシグナル伝達に作用します。ミトコンドリア超微細構造および生体エネルギー恒常性の破綻は、神経変性、心代謝機能障害など、ミトコンドリアの完全性が主要な実験的評価項目となる各種疾患モデルにおいて重要です。

CHCHD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるChchd6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Chchd6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Chchd6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CHCHD6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CHCHD6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Chchd6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CHCHD6の機能に不可欠なChchd6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Chchd6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CHCHD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCHCHD6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Chchd6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CHCHD6 HDRプラスミド（m）および CHCHD6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはChchd6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のChchd6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。